ফ্লুরোসেন্স রেজোন্যান্স এনার্জি ট্রান্সফার (FRET)
ফ্লুরোসেন্স রেজোন্যান্স এনার্জি ট্রান্সফার (এফআরইটি) হল একটি অ-বিকিরণকারী শক্তি স্থানান্তর প্রক্রিয়া যেখানে আন্তঃআণবিক বৈদ্যুতিক দম্পতির মিথস্ক্রিয়ার মাধ্যমে দাতা উত্তেজিত রাষ্ট্রীয় শক্তি গ্রহণকারী উত্তেজিত অবস্থায় স্থানান্তরিত হয়।এই প্রক্রিয়ায় ফোটন জড়িত নয় এবং তাই অ-বিকিরণকারী।এই পরীক্ষায় দ্রুত, সংবেদনশীল এবং সহজ হওয়ার সুবিধা রয়েছে।
FRET অ্যাসে ব্যবহৃত ছোপ অভিন্ন হতে পারে.কিন্তু বেশিরভাগ অ্যাপ্লিকেশনে, বিভিন্ন রং আসলে ব্যবহার করা হয়।সংক্ষেপে, আলোকিত অনুরণন শক্তির স্থানান্তর হল দাতা (ডাই 1) থেকে গ্রহণকারী (ডাই 2) থেকে এক জোড়া ডাইপোল স্থানান্তর করা যখন দাতা গোষ্ঠী উত্তেজিত হয়।সাধারণভাবে, ডোনার ফ্লুরোফোর গ্রুপের নির্গমন বর্ণালী গ্রহণকারী গ্রুপের শোষণ বর্ণালীর সাথে ওভারল্যাপ করে।"যখন দুটি ফ্লুরোফোরের মধ্যে দূরত্ব যথাযথ হয় (10 - 100 A), দাতা থেকে গ্রহণকারীর কাছে ফ্লুরোফোর শক্তির স্থানান্তর লক্ষ্য করা যায়।"শক্তি স্থানান্তরের পদ্ধতি রিসেপ্টরের রাসায়নিক কাঠামোর উপর নির্ভর করে:
1. আণবিক কম্পনে রূপান্তরিত হয়, অর্থাৎ শক্তি স্থানান্তরের উজ্জ্বল আলো অদৃশ্য হয়ে যায়।(রিসেপ্টর হল একটি আলো নিবারক)
2. নির্গমনটি রিসেপ্টরের চেয়ে বেশি তীব্র, ফলে সেকেন্ডারি ফ্লুরোসেন্স বর্ণালীতে একটি লাল স্থানান্তর ঘটে।"(রিসেপ্টর হল ভাস্বর নির্গতকারী)।
দাতা গোষ্ঠী (EDANS) এবং গ্রহণকারী জিন (DABCYL) এইচআইভি প্রোটিজের প্রাকৃতিক সাবস্ট্রেটের সাথে সমানভাবে যুক্ত, এবং যখন সাবস্ট্রেটটি সংযোগ বিচ্ছিন্ন করা হয় না, তখন DABCYL EDANS কে কোয়েনল করতে পারে এবং তারপরে ফ্লোরিনে সনাক্ত করা যায় না।এইচআইভি-1 প্রোটিজ সংযোগ বিচ্ছিন্ন হওয়ার পরে, ডিএবিসিআইএল দ্বারা ইডিএএনএস আর নিভে যায় না এবং ইডিএএনএস লুসিফেরেসগুলি পরবর্তীকালে সনাক্ত করা যায়।EDANS এর ফ্লুরোসেন্স তীব্রতার পরিবর্তনের মাধ্যমে প্রোটেজ ইনহিবিটারগুলির প্রাপ্যতা নিরীক্ষণ করা যেতে পারে।
FRET পেপটাইডগুলি পেপটাইডেজের অনির্দিষ্টতা অধ্যয়নের জন্য সুবিধাজনক সরঞ্জাম।যেহেতু এর প্রতিক্রিয়া প্রক্রিয়া ক্রমাগত নিরীক্ষণ করা যেতে পারে, এটি এনজাইমের কার্যকলাপ সনাক্ত করার জন্য একটি সুবিধাজনক পদ্ধতি প্রদান করে।দাতা/গ্রহণকারী দ্বারা পেপটাইড বন্ডের হাইড্রোলাইসিসের পরে উত্পাদিত চকচকে ন্যানোমোলার ঘনত্বে এনজাইম কার্যকলাপের একটি পরিমাপ প্রদান করে।যখন FRET পেপটাইড অক্ষত থাকে, তখন এটি অভ্যন্তরীণ ফ্ল্যাশের আকস্মিক অন্তর্ধান দেখায়, কিন্তু যখন দাতা/গ্রহণকারীর বিপরীতে কোনো পেপটাইড বন্ধন ভেঙ্গে যায়, তখন এটি একটি ফ্ল্যাশ প্রকাশ করে, যা ক্রমাগত সনাক্ত করা যায় এবং তারপর এনজাইমের কার্যকলাপের পরিমাণ নির্ধারণ করা যেতে পারে।
পোস্টের সময়: আগস্ট-14-2023