HPLC ব্যর্থতা এবং সমাধান সবচেয়ে প্রবণ

একটি উচ্চ-নির্ভুল যন্ত্র হিসাবে, HPLC সহজেই কিছু ঝামেলাপূর্ণ ছোট সমস্যা হতে পারে যদি এটি ব্যবহারের সময় সঠিক উপায়ে পরিচালিত না হয়।সবচেয়ে সাধারণ সমস্যাগুলির মধ্যে একটি হল কলাম কম্প্রেশন সমস্যা।কীভাবে দ্রুত একটি ত্রুটিপূর্ণ ক্রোমাটোগ্রাফের সমস্যা সমাধান করবেন।এইচপিএলসি সিস্টেমে প্রধানত একটি জলাধার বোতল, একটি পাম্প, একটি ইনজেক্টর, একটি কলাম, একটি কলাম তাপমাত্রা চেম্বার, একটি আবিষ্কারক এবং একটি ডেটা প্রসেসিং সিস্টেম থাকে।পুরো সিস্টেমের জন্য, স্তম্ভ, পাম্প এবং ডিটেক্টর হল মূল উপাদান এবং সমস্যা প্রবণ প্রধান অবস্থান।

HPLC ব্যবহার করার সময় কলামের চাপের চাবিকাঠি হল সেই ক্ষেত্রটি যেখানে ঘনিষ্ঠভাবে মনোযোগ দেওয়া প্রয়োজন।কলামের চাপের স্থায়িত্ব ক্রোমাটোগ্রাফিক পিক আকৃতি, কলামের দক্ষতা, বিচ্ছেদ দক্ষতা এবং ধরে রাখার সময়ের সাথে ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত।কলাম চাপের স্থিতিশীলতার মানে এই নয় যে চাপের মান একটি স্থিতিশীল মানতে স্থিতিশীল, বরং চাপের ওঠানামার পরিসীমা 345kPa বা 50PSI এর মধ্যে (যখন কলামের চাপ স্থিতিশীল এবং ধীরে ধীরে পরিবর্তিত হয় তখন গ্রেডিয়েন্ট ইলুশন ব্যবহার করার অনুমতি দেয়)।খুব বেশি বা খুব কম চাপ একটি কলাম চাপ সমস্যা।

HPLC ব্যর্থতা এবং সমাধান সবচেয়ে প্রবণ

1, HPLC ব্যবহারে উচ্চ চাপ সবচেয়ে সাধারণ সমস্যা।এর মানে হঠাৎ চাপ বেড়ে যাওয়া।সাধারণভাবে, নিম্নলিখিত কারণ রয়েছে: (1) সাধারণভাবে, এটি প্রবাহ চ্যানেল ব্লকেজের কারণে হয়।এই মুহুর্তে, আমাদের এটি টুকরো টুকরো পরীক্ষা করা উচিত।কপ্রথমে ভ্যাকুয়াম পাম্পের খাঁড়ি কেটে ফেলুন।এই মুহুর্তে, PEEK টিউবটি তরল দিয়ে ভরা হয়েছিল যাতে PEEK টিউবটি দ্রাবক বোতলের চেয়ে ছোট ছিল তা দেখতে তরলটি ইচ্ছামত ফোঁটাচ্ছে কিনা।যদি তরল ফোঁটা না হয় বা ধীরে ধীরে ফোঁটা না হয়, তাহলে দ্রাবক ফিল্টার হেড ব্লক করা হয়।চিকিত্সা: 30% নাইট্রিক অ্যাসিডে আধা ঘন্টা ভিজিয়ে রাখুন এবং অতি বিশুদ্ধ জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন।যদি তরল এলোমেলোভাবে ড্রিপ হয়, দ্রাবক ফিল্টার হেড স্বাভাবিক এবং পরীক্ষা করা হচ্ছে;খ.Purge ভালভ খুলুন যাতে মোবাইল ফেজ কলামের মধ্য দিয়ে না যায়, এবং যদি চাপ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস না হয়, ফিল্টার হোয়াইট হেড ব্লক করা হয়।চিকিত্সা: ফিল্টার করা হোয়াইটহেডগুলি সরানো হয়েছিল এবং আধা ঘন্টার জন্য 10% আইসোপ্রোপ্যানল দিয়ে সোনিকেট করা হয়েছিল।অনুমান করা হচ্ছে যে চাপ 100PSI এর নিচে নেমে গেছে, ফিল্টার করা সাদা মাথা স্বাভাবিক এবং পরীক্ষা করা হচ্ছে;গ.কলামের প্রস্থান প্রান্তটি সরান, যদি চাপ না কমে, কলামটি অবরুদ্ধ হয়।চিকিত্সা: যদি এটি একটি বাফার লবণ ব্লকেজ হয়, চাপ স্বাভাবিক না হওয়া পর্যন্ত 95% ধুয়ে ফেলুন।যদি কিছু বেশি সংরক্ষিত উপাদানের কারণে বাধা সৃষ্টি হয়, তাহলে স্বাভাবিক চাপের দিকে ধাবিত হতে বর্তমান মোবাইল ফেজের চেয়ে শক্তিশালী প্রবাহ ব্যবহার করা উচিত।যদি উপরের পদ্ধতি অনুসারে দীর্ঘমেয়াদী পরিষ্কারের চাপ না কমে, তবে কলামের ইনলেট এবং আউটলেটকে বিপরীতে যন্ত্রের সাথে সংযুক্ত বলে বিবেচনা করা যেতে পারে এবং কলামটি মোবাইল ফেজ দিয়ে পরিষ্কার করা যেতে পারে।এই সময়ে, যদি কলাম চাপ এখনও হ্রাস না হয়, কলাম প্রবেশদ্বার চালনি প্লেট শুধুমাত্র প্রতিস্থাপিত করা যেতে পারে, কিন্তু একবার অপারেশন ভাল না হলে, এটি কলাম প্রভাব হ্রাস হতে সহজ, তাই কম ব্যবহার করার চেষ্টা করুন.কঠিন সমস্যার জন্য, কলাম প্রতিস্থাপন বিবেচনা করা যেতে পারে।

(2) ভুল প্রবাহ হার সেটিং: সঠিক প্রবাহ হার পুনরায় সেট করা যেতে পারে।

(3) ভুল প্রবাহ অনুপাত: প্রবাহের বিভিন্ন অনুপাতের সান্দ্রতা সূচক ভিন্ন, এবং উচ্চ সান্দ্রতা সহ প্রবাহের সংশ্লিষ্ট সিস্টেম চাপও বড়।যদি সম্ভব হয়, নিম্ন সান্দ্রতা দ্রাবক প্রতিস্থাপন বা পুনরায় সেট এবং প্রস্তুত করা যেতে পারে।

(4) সিস্টেম চাপ শূন্য প্রবাহ: তরল স্তরের সেন্সরের শূন্য সামঞ্জস্য করুন।

2, চাপ খুব কম (1) সাধারণত সিস্টেম ফুটো দ্বারা সৃষ্ট হয়.কি করতে হবে: প্রতিটি সংযোগ খুঁজুন, বিশেষ করে কলামের উভয় প্রান্তে ইন্টারফেস, এবং লিক এলাকা আঁটসাঁট করুন।পোস্টটি সরান এবং উপযুক্ত বল দিয়ে PTFE ফিল্মটিকে শক্ত করুন বা লাইন করুন।

(2) গ্যাস পাম্পে প্রবেশ করে, কিন্তু চাপ সাধারণত এই সময়ে অস্থির থাকে, উচ্চ এবং নিম্ন।আরও গুরুতরভাবে, পাম্প তরল শোষণ করতে সক্ষম হবে না।চিকিত্সা পদ্ধতি: ক্লিনিং ভালভ খুলুন এবং 3~5ml/মিনিট প্রবাহ হারে পরিষ্কার করুন।যদি না হয়, বায়ু বুদবুদ একটি নিবেদিত সুই টিউব ব্যবহার করে নিষ্কাশন ভালভ এ উচ্চাকাঙ্খিত ছিল.

(3) মোবাইল ফেজ বহিঃপ্রবাহ নেই: জলাধারের বোতলে মোবাইল ফেজ আছে কিনা, মোবাইল ফেজে সিঙ্ক ডুবে আছে কিনা এবং পাম্প চলছে কিনা তা পরীক্ষা করুন।

(4) রেফারেন্স ভালভ বন্ধ নেই: রেফারেন্স ভালভটি ক্ষয় হওয়ার পরে বন্ধ হয়ে যায়।এটি সাধারণত 0.1-এ নেমে যায়।রেফারেন্স ভালভ বন্ধ করার পরে ~ 0.2mL/ মিনিট।

সারসংক্ষেপ:

এই কাগজে, তরল ক্রোমাটোগ্রাফিতে শুধুমাত্র সাধারণ সমস্যাগুলি বিশ্লেষণ করা হয়েছে।অবশ্যই, আমাদের ব্যবহারিক প্রয়োগে, আমরা আরও অন্যান্য সমস্যার সম্মুখীন হব।ফল্ট পরিচালনার ক্ষেত্রে, আমাদের নিম্নলিখিত নীতিগুলি অনুসরণ করা উচিত: অনুমানমূলক ফ্যাক্টর এবং সমস্যার মধ্যে সম্পর্ক নির্ধারণ করতে একবারে শুধুমাত্র একটি ফ্যাক্টর পরিবর্তন করুন;সাধারণত, সমস্যা সমাধানের জন্য অংশগুলি প্রতিস্থাপন করার সময়, বর্জ্য প্রতিরোধ করার জন্য আমাদের ভেঙে ফেলা অক্ষত অংশগুলিকে আবার জায়গায় রাখার দিকে মনোযোগ দেওয়া উচিত;একটি ভাল রেকর্ড অভ্যাস গঠন দোষ পরিচালনার সাফল্যের চাবিকাঠি।উপসংহারে, এইচপিএলসি ব্যবহার করার সময়, নমুনা প্রিট্রিটমেন্ট এবং সরঞ্জামগুলির সঠিক অপারেশন এবং রক্ষণাবেক্ষণের দিকে মনোযোগ দেওয়া গুরুত্বপূর্ণ।